Широко разпространената употреба на синтетични пестициди доведе до много проблеми, включително появата на резистентни организми, влошаване на околната среда и вреда за човешкото здраве. Следователно, нови микробни...пестицидиСпешно са необходими безопасни за човешкото здраве и околната среда биосърфактанти. В това проучване е използван рамнолипиден биосърфактант, произведен от Enterobacter cloacae SJ2, за оценка на токсичността за ларвите на комари (Culex quinquefasciatus) и термити (Odontotermes obesus). Резултатите показват, че е налице дозозависима смъртност между третиранията. Стойността на LC50 (50% летална концентрация) на 48-ия час за биосърфактанти на термити и ларви на комари е определена с помощта на метод за нелинейно регресионно напасване на кривата. Резултатите показват, че 48-часовите стойности на LC50 (95% доверителен интервал) на ларвицидната и антитермитната активност на биосърфактанта са съответно 26,49 mg/L (диапазон от 25,40 до 27,57) и 33,43 mg/L (диапазон от 31,09 до 35,68). Според хистопатологичното изследване, третирането с биосърфактанти е причинило тежки увреждания на органелните тъкани на ларвите и термитите. Резултатите от това проучване показват, че микробният биосърфактант, произвеждан от Enterobacter cloacae SJ2, е отлично и потенциално ефективно средство за контрол на Cx, quinquefasciatus и O. obesus.
Тропическите страни са засегнати от голям брой заболявания, пренасяни от комари1. Значението на заболяванията, пренасяни от комари, е широко разпространено. Повече от 400 000 души умират от малария всяка година, а някои големи градове преживяват епидемии от сериозни заболявания като денга, жълта треска, чикунгуня и Зика.2 Векторните заболявания са свързани с една от всеки шест инфекции в световен мащаб, като комарите причиняват най-значителния брой случаи3,4. Culex, Anopheles и Aedes са трите рода комари, които най-често се свързват с предаването на болести5. Разпространението на денга, инфекция, предавана от комара Aedes aegypti, се е увеличило през последното десетилетие и представлява значителна заплаха за общественото здраве4,7,8. Според Световната здравна организация (СЗО) повече от 40% от населението на света е изложено на риск от денга, като 50–100 милиона нови случая се появяват годишно в повече от 100 страни9,10,11. Денгата се превърна в основен проблем за общественото здраве, тъй като честотата ѝ се е увеличила в световен мащаб12,13,14. Anopheles gambiae, известен още като африкански комар Anopheles, е най-важният вектор на човешка малария в тропическите и субтропичните региони15. Вирусът на Западен Нил, енцефалитът от Сейнт Луис, японският енцефалит и вирусните инфекции на коне и птици се предават от комари Culex, често наричани обикновени домашни комари. Освен това те са и преносители на бактериални и паразитни заболявания16. В света има повече от 3000 вида термити и те съществуват от повече от 150 милиона години17. Повечето вредители живеят в почвата и се хранят с дървесина и дървесни продукти, съдържащи целулоза. Индийският термит Odontotermes obesus е важен вредител, който причинява сериозни щети на важни култури и дървета18. В земеделските райони нападенията от термити на различни етапи могат да причинят огромни икономически щети на различни култури, дървесни видове и строителни материали. Термитите могат да причинят и проблеми със здравето на човека19.
Въпросът за резистентността от микроорганизми и вредители в днешната фармацевтична и селскостопанска област е сложен20,21. Следователно, и двете компании трябва да търсят нови рентабилни антимикробни средства и безопасни биопестициди. Вече са налични синтетични пестициди, за които е доказано, че са инфекциозни и отблъскват нецелеви полезни насекоми22. През последните години изследванията върху биоповърхностно активните вещества се разшириха поради приложението им в различни индустрии. Биоповърхностно активните вещества са много полезни и жизненоважни в селското стопанство, рекултивацията на почвата, добива на петрол, премахването на бактерии и насекоми и преработката на храни23,24. Биоповърхностно активните вещества или микробните повърхностноактивни вещества са биоповърхностно активни химикали, произвеждани от микроорганизми като бактерии, дрожди и гъбички в крайбрежни местообитания и замърсени с нефт райони25,26. Химически получените повърхностноактивни вещества и биоповърхностно активните вещества са два вида, които се получават директно от естествената среда27. Различни биоповърхностно активни вещества се получават от морски местообитания28,29. Следователно, учените търсят нови технологии за производство на биоповърхностно активни вещества на базата на естествени бактерии30,31. Напредъкът в подобни изследвания показва значението на тези биологични съединения за опазването на околната среда32. Bacillus, Pseudomonas, Rhodococcus, Alcaligenes, Corynebacterium и тези бактериални родове са добре проучени представители23,33.
Съществуват много видове биоповърхностно активни вещества с широк спектър от приложения34. Значително предимство на тези съединения е, че някои от тях имат антибактериална, ларвицидна и инсектицидна активност. Това означава, че те могат да се използват в селскостопанската, химическата, фармацевтичната и козметичната промишленост35,36,37,38. Тъй като биоповърхностно активните вещества обикновено са биоразградими и екологично полезни, те се използват в интегрирани програми за борба с вредителите за защита на културите39. По този начин са получени основни познания за ларвицидната и антитермитната активност на микробните биоповърхностно активни вещества, произвеждани от Enterobacter cloacae SJ2. Изследвахме смъртността и хистологичните промени при излагане на различни концентрации на рамнолипидни биоповърхностно активни вещества. Освен това оценихме широко използваната компютърна програма за количествена структура-активност (QSAR) Ecological Structure-Activity (ECOSAR), за да определим острата токсичност за микроводорасли, дафнии и риби.
В това проучване е тествана антитермитната активност (токсичност) на пречистени биосурфактанти при различни концентрации, вариращи от 30 до 50 mg/ml (на интервали от 5 mg/ml), срещу индийски термити, O. obesus и четвърти вид. Оценка. Ларви на стадий Cx. Ларви на комари quinquefasciatus. Концентрации на LC50 на биосурфактанта за 48 часа срещу O. obesus и Cx. C. solanacearum. Ларвите на комарите са идентифицирани с помощта на метод за нелинейно регресионно напасване на кривата. Резултатите показват, че смъртността от термити се увеличава с увеличаване на концентрацията на биосурфактанта. Резултатите показват, че биосърфактантът има ларвицидна активност (Фигура 1) и антитермитна активност (Фигура 2), със стойности на LC50 за 48 часа (95% CI) съответно 26,49 mg/L (25,40 до 27,57) и 33,43 mg/l (Фиг. 31,09 до 35,68) (Таблица 1). По отношение на острата токсичност (48 часа), биосърфактантът е класифициран като „вреден“ за тестваните организми. Биосърфактантът, произведен в това проучване, показва отлична ларвицидна активност със 100% смъртност в рамките на 24-48 часа след експозиция.
Изчислете стойността на LC50 за ларвицидна активност. Апроксимация на нелинейната регресионна крива (плътна линия) и 95% доверителен интервал (защрихована област) за относителна смъртност (%).
Изчислете стойността на LC50 за антитермитна активност. Апроксимация с крива на нелинейна регресия (плътна линия) и 95% доверителен интервал (защрихована област) за относителна смъртност (%).
В края на експеримента, морфологични промени и аномалии бяха наблюдавани под микроскоп. Морфологични промени бяха наблюдавани в контролната и третираната група при 40-кратно увеличение. Както е показано на Фигура 3, нарушение на растежа се наблюдава при по-голямата част от ларвите, третирани с биоповърхностно активни вещества. Фигура 3а показва нормален Cx. quinquefasciatus, Фигура 3b показва аномален Cx. Причинява пет ларви на нематоди.
Ефект на сублетални (LC50) дози биосърфактанти върху развитието на ларвите на Culex quinquefasciatus. Светлинно-микроскопско изображение (а) на нормален Cx при 40× увеличение. quinquefasciatus (б) Анормален Cx. Причинява пет ларви на нематоди.
В настоящото проучване, хистологичното изследване на третираните ларви (фиг. 4) и термити (фиг. 5) разкри няколко аномалии, включително намаляване на коремната площ и увреждане на мускулите, епителните слоеве и кожата в средното черво. Хистологията разкри механизма на инхибиторната активност на биосърфактанта, използван в това проучване.
Хистопатология на нормални нетретирани Cx ларви в 4-ти стадий. Ларви на quinquefasciatus (контрола: (a,b)) и третирани с биосурфактант (третиране: (c,d)). Стрелките показват третиран чревен епител (epi), ядра (n) и мускул (mu). Стълбчета = 50 µm.
Хистопатология на нормален нетретиран O. obesus (контрола: (a, b)) и третиран с биосурфактант (лечение: (c, d)). Стрелките показват съответно чревен епител (epi) и мускул (mu). Стълбовете = 50 µm.
В това проучване ECOSAR беше използван за прогнозиране на острата токсичност на биоактивни продукти от рамнолипиди за първични продуценти (зелени водорасли), първични консументи (водни бълхи) и вторични консументи (риби). Тази програма използва сложни количествени модели на структура-активност на съединенията, за да оцени токсичността въз основа на молекулярната структура. Моделът използва софтуер за структура-активност (SAR), за да изчисли острата и дългосрочна токсичност на веществата за водните видове. По-конкретно, Таблица 2 обобщава очакваните средни летални концентрации (LC50) и средни ефективни концентрации (EC50) за няколко вида. Предполагаемата токсичност е категоризирана в четири нива, използвайки Глобално хармонизираната система за класификация и етикетиране на химикали (Таблица 3).
Контрол на векторно пренасяни болести, особено щамове комари и комари Aedes. Египтяните сега работят трудно 40,41,42,43,44,45,46. Въпреки че някои химически достъпни пестициди, като пиретроиди и органофосфати, са донякъде полезни, те представляват значителни рискове за човешкото здраве, включително диабет, репродуктивни нарушения, неврологични разстройства, рак и респираторни заболявания. Освен това, с течение на времето тези насекоми могат да станат резистентни към тях13,43,48. По този начин ефективните и екологично чисти биологични мерки за контрол ще се превърнат в по-популярен метод за контрол на комарите49,50. Бенели51 предполага, че ранният контрол на комарите вектори би бил по-ефективен в градските райони, но не препоръчват използването на ларвициди в селските райони52. Том и др.53 също предполагат, че контролирането на комарите в техните незрели стадии би било безопасна и проста стратегия, тъй като те са по-чувствителни към контролните агенти54.
Производството на биосърфактанти от мощен щам (Enterobacter cloacae SJ2) показа постоянна и обещаваща ефикасност. Нашето предишно проучване съобщава, че Enterobacter cloacae SJ2 оптимизира производството на биосърфактанти, използвайки физикохимични параметри26. Според тяхното проучване, оптималните условия за производство на биосърфактанти от потенциален изолат на E. cloacae са инкубация в продължение на 36 часа, разбъркване при 150 rpm, pH 7.5, 37 °C, соленост 1 ppt, 2% глюкоза като източник на въглерод, 1% мая. Екстрактът е използван като източник на азот за получаване на 2.61 g/L биосърфактанти. В допълнение, биосърфактантите са характеризирани с помощта на TLC, FTIR и MALDI-TOF-MS. Това потвърждава, че рамнолипидът е биосърфактант. Гликолипидните биосърфактанти са най-интензивно изучаваният клас от други видове биосърфактанти55. Те се състоят от въглехидратни и липидни части, главно вериги на мастни киселини. Сред гликолипидите, основните представители са рамнолипид и софоролипид56. Рамнолипидите съдържат две рамнозни групи, свързани с моно- или ди-β-хидроксидеканова киселина57. Употребата на рамнолипиди в медицинската и фармацевтичната промишленост е добре установена58, в допълнение към неотдавнашната им употреба като пестициди59.
Взаимодействието на биосърфактанта с хидрофобната област на дихателния сифон позволява на водата да преминава през устичната му кухина, като по този начин се увеличава контактът на ларвите с водната среда. Наличието на биосърфактанти влияе и на трахеята, чиято дължина е близо до повърхността, което улеснява ларвите да изпълзят до повърхността и да дишат. В резултат на това повърхностното напрежение на водата намалява. Тъй като ларвите не могат да се прикрепят към повърхността на водата, те падат на дъното на резервоара, нарушавайки хидростатичното налягане, което води до прекомерен разход на енергия и смърт от удавяне38,60. Подобни резултати са получени от Ghribi61, където биосърфактант, произведен от Bacillus subtilis, проявява ларвицидна активност срещу Ephestia kuehniella. По подобен начин ларвицидната активност на Cx. Das и Mukherjee23 също оценява ефекта на цикличните липопептиди върху ларвите на quinquefasciatus.
Резултатите от това проучване се отнасят до ларвицидната активност на рамнолипидни биосърфактанти срещу Cx. Убиването на комари quinquefasciatus е в съответствие с публикувани по-рано резултати. Например, използват се биосърфактанти на базата на сърфактини, произведени от различни бактерии от рода Bacillus и Pseudomonas spp. Някои ранни доклади64,65,66 съобщават за ларвоубиваща активност на липопептидни биосърфактанти от Bacillus subtilis23. Deepali et al.63 установяват, че рамнолипиден биосърфактант, изолиран от Stenotropomonas maltophilia, има мощна ларвицидна активност при концентрация от 10 mg/L. Silva et al.67 съобщават за ларвицидната активност на рамнолипиден биосърфактант срещу Ae при концентрация от 1 g/L. Aedes aegypti. Kanakdande et al. 68 съобщава, че липопептидни биоповърхностно активни вещества, произведени от Bacillus subtilis, причиняват обща смъртност при ларви на Culex и термити с липофилната фракция на Eucalyptus. По подобен начин, Masendra et al. 69 съобщават за смъртност на работни мравки (Cryptotermes cynocephalus Light.) от 61,7% в липофилните n-хексанови и EtOAc фракции на суровия екстракт от E.
Партипан и др. 70 съобщават за инсектицидното използване на липопептидни биосърфактанти, произведени от Bacillus subtilis A1 и Pseudomonas stutzeri NA3, срещу Anopheles Stephensi, вектор на маларийния паразит Plasmodium. Те наблюдават, че ларвите и какавидите оцеляват по-дълго, имат по-кратки периоди на яйцекладене, са стерилни и имат по-кратка продължителност на живота, когато са третирани с различни концентрации на биосърфактанти. Наблюдаваните LC50 стойности на биосърфактанта A1 на B. subtilis са съответно 3,58, 4,92, 5,37, 7,10 и 7,99 mg/L за различните ларвни състояния (т.е. ларви I, II, III, IV и стадий какавида). За сравнение, биосърфактантите за ларвни стадии I-IV и какавидни стадии на Pseudomonas stutzeri NA3 са съответно 2,61, 3,68, 4,48, 5,55 и 6,99 mg/L. Смята се, че забавената фенология на оцелелите ларви и какавиди е резултат от значителни физиологични и метаболитни нарушения, причинени от третиране с инсектициди71.
Щамът Wickerhamomyces anomalus CCMA 0358 произвежда биоповърхностно активно вещество със 100% ларвицидна активност срещу комари Aedes. 24-часовият интервал от 38 при aegypti е по-висок от докладваното от Silva et al. Биоповърхностно активно вещество, произведено от Pseudomonas aeruginosa, използващо слънчогледово олио като източник на въглерод, е доказано, че убива 100% от ларвите в рамките на 48 часа 67. Abinaya et al.72 и Pradhan et al.73 също демонстрираха ларвицидните или инсектицидните ефекти на повърхностноактивните вещества, произведени от няколко изолата от рода Bacillus. Предишно публикувано проучване на Senthil-Nathan et al. установи, че 100% от ларвите на комарите, изложени на растителни лагуни, е вероятно да умрат. 74.
Оценката на сублеталните ефекти на инсектицидите върху биологията на насекомите е от решаващо значение за интегрираните програми за борба с вредителите, тъй като сублеталните дози/концентрации не убиват насекомите, но могат да намалят популациите на насекомите в бъдещите поколения, като нарушат биологичните им характеристики10. Siqueira et al75 наблюдават пълна ларвицидна активност (100% смъртност) на рамнолипиден биосърфактант (300 mg/ml), когато е тестван при различни концентрации, вариращи от 50 до 300 mg/ml. Ларвен стадий на щамове Aedes aegypti. Те анализират ефектите от времето до смърт и сублеталните концентрации върху оцеляването на ларвите и плувната активност. Освен това, те наблюдават намаляване на скоростта на плуване след 24–48 часа излагане на сублетални концентрации на биосърфактант (напр. 50 mg/mL и 100 mg/mL). Смята се, че отровите, които имат обещаващи сублетални роли, са по-ефективни при причиняване на множество щети на откритите вредители76.
Хистологичните наблюдения на нашите резултати показват, че биоповърхностно активните вещества, произведени от Enterobacter cloacae SJ2, значително променят тъканите на ларвите на комари (Cx. quinquefasciatus) и термити (O. obesus). Подобни аномалии са причинени от препарати от босилеково масло при An. gambiaes.s и An. arabica, описани от Ochola77. Kamaraj et al.78 също описват същите морфологични аномалии при An. Ларвите на Stephanie са били изложени на златни наночастици. Vasantha-Srinivasan et al.79 също съобщават, че етеричното масло от овчарска торбичка силно уврежда камерните и епителните слоеве на Aedes albopictus. Aedes aegypti. Raghavendran et al. съобщават, че ларвите на комарите са третирани с 500 mg/ml мицелен екстракт от местна гъба Penicillium. Ae показват тежки хистологични увреждания. aegypti и Cx. Смъртност 80. Преди това Abinaya et al. са изследвани ларвите на An в четвърти стадий. Stephensi и Ae. aegypti открива множество хистологични промени в Aedes aegypti, третиран с екзополизахариди на B. licheniformis, включително цекум на стомаха, мускулна атрофия, увреждане и дезорганизация на ганглиите на нервните снопове72. Според Raghavendran et al., след третиране с мицелен екстракт от P. daleae, клетките на средните черва на тестваните комари (ларви в 4-ти стадий) показват подуване на чревния лумен, намаляване на междуклетъчното съдържание и ядрена дегенерация81. Същите хистологични промени са наблюдавани при ларви на комари, третирани с екстракт от листа на ехинацея, което показва инсектицидния потенциал на третираните съединения50.
Използването на софтуера ECOSAR е получило международно признание82. Настоящите изследвания показват, че острата токсичност на биоповърхностно активните вещества ECOSAR върху микроводорасли (C. vulgaris), риби и водни бълхи (D. magna) попада в категорията „токсичност“, дефинирана от Организацията на обединените нации83. Моделът за екотоксичност ECOSAR използва SAR и QSAR за прогнозиране на острата и дългосрочна токсичност на веществата и често се използва за прогнозиране на токсичността на органичните замърсители82,84.
Параформалдехид, натриев фосфатен буфер (pH 7,4) и всички други химикали, използвани в това проучване, са закупени от HiMedia Laboratories, Индия.
Производството на биосърфактант се извършва в 500 mL Ерленмайерови колби, съдържащи 200 mL стерилна среда Bushnell Haas, допълнена с 1% суров петрол като единствен източник на въглерод. Предкултура от Enterobacter cloacae SJ2 (1.4 × 104 CFU/ml) се инокулира и култивира на орбитален шейкър при 37°C, 200 rpm в продължение на 7 дни. След инкубационния период, биосърфактантът се екстрахира чрез центрофугиране на културалната среда при 3400×g за 20 минути при 4°C и полученият супернатант се използва за скринингови цели. Процедурите за оптимизация и характеризиране на биосърфактантите са възприети от нашето по-ранно проучване26.
Ларвите на Culex quinquefasciatus са получени от Центъра за напреднали изследвания в морската биология (CAS), Паланчипетай, Тамил Наду (Индия). Ларвите са отглеждани в пластмасови контейнери, пълни с дейонизирана вода, при 27 ± 2°C и фотопериод от 12:12 (светлина:тъмнина). Ларвите на комарите са хранени с 10% разтвор на глюкоза.
Ларви на Culex quinquefasciatus са открити в отворени и незащитени септични ями. Използвайте стандартните насоки за класификация, за да идентифицирате и култивирате ларвите в лаборатория85. Ларвицидни опити са проведени в съответствие с препоръките на Световната здравна организация86. SH. Ларвите на quinquefasciatus в четвърти стадий са събрани в затворени епруветки на групи от 25 ml и 50 ml с въздушна междина от две трети от капацитета им. Биосърфактант (0–50 mg/ml) е добавен към всяка епруветка поотделно и е съхраняван при 25 °C. Контролната епруветка е използвала само дестилирана вода (50 ml). За мъртви ларви са считани тези, които не са показвали признаци на плуване по време на инкубационния период (12–48 часа)87. Изчислете процента на смъртност на ларвите, като използвате уравнението. (1)88.
Семейство Odontotermitidae включва индийския термит Odontotermes obesus, открит в гниещи трупи в Селскостопанския кампус (Университет Анамалай, Индия). Тествайте този биоповърхностноактивно вещество (0–50 mg/ml), като използвате нормални процедури, за да определите дали е вреден. След изсушаване в ламинарен въздушен поток в продължение на 30 минути, всяка лента от хартия Whatman беше покрита с биоповърхностноактивно вещество с концентрация от 30, 40 или 50 mg/ml. Предварително покрити и непокрити хартиени ленти бяха тествани и сравнени в центъра на петриева паничка. Всяка петриева паничка съдържа около тридесет активни термита O. obesus. Контролните и тестовите термити получиха мокра хартия като източник на храна. Всички панички бяха държани на стайна температура през целия инкубационен период. Термитите умряха след 12, 24, 36 и 48 часа89,90. След това уравнение 1 беше използвано за оценка на процента на смъртност от термити при различни концентрации на биоповърхностноактивно вещество. (2).
Пробите бяха съхранявани върху лед и опаковани в микроепруветки, съдържащи 100 ml 0,1 M натриев фосфатен буфер (pH 7,4) и изпратени в Централната лаборатория по патология на аквакултурите (CAPL) към Центъра за аквакултури „Раджив Ганди“ (RGCA), Хистологична лаборатория, Сиркали, окръг Майиладутурай, Тамил Наду, Индия, за допълнителен анализ. Пробите бяха незабавно фиксирани в 4% параформалдехид при 37°C за 48 часа.
След фазата на фиксиране, материалът се промива три пъти с 0,1 М натриев фосфатен буфер (pH 7,4), поетапно се дехидратира в етанол и се накисва в смола LEICA в продължение на 7 дни. След това веществото се поставя в пластмасова форма, запълнена със смола и полимеризатор, и след това се поставя в пещ, загрята до 37°C, докато блокът, съдържащ веществото, се полимеризира напълно.
След полимеризацията, блоковете бяха нарязани с помощта на микротом LEICA RM2235 (Rankin Biomedical Corporation 10,399 Enterprise Dr. Davisburg, MI 48,350, USA) до дебелина 3 mm. Срезите са групирани върху предметни стъкла, с шест среза на предметно стъкло. Слайдовете бяха изсушени при стайна температура, след което оцветени с хематоксилин в продължение на 7 минути и промити с течаща вода в продължение на 4 минути. Освен това, разтворът на еозина се нанася върху кожата за 5 минути и се изплаква с течаща вода в продължение на 5 минути.
Острата токсичност беше предсказана с помощта на водни организми от различни тропически нива: 96-часова LC50 за риби, 48-часова LC50 за D. magna и 96-часова EC50 за зелени водорасли. Токсичността на рамнолипидни биоповърхностно активни вещества за риби и зелени водорасли беше оценена с помощта на софтуера ECOSAR версия 2.2 за Windows, разработен от Агенцията за опазване на околната среда на САЩ. (Достъпно онлайн на https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model).
Всички тестове за ларвицидна и антитермитна активност бяха проведени в три екземпляра. Беше извършена нелинейна регресия (логаритъм на променливите доза-отговор) на данните за смъртността на ларвите и термити, за да се изчисли средната летална концентрация (LC50) с 95% доверителен интервал, а кривите на концентрация-отговор бяха генерирани с помощта на Prism® (версия 8.0, GraphPad Software) Inc., САЩ) 84, 91.
Настоящото проучване разкрива потенциала на микробните биосърфактанти, продуцирани от Enterobacter cloacae SJ2, като ларвицидни и антитермитни агенти срещу комари и тази работа ще допринесе за по-добро разбиране на механизмите на ларвицидно и антитермитно действие. Хистологични изследвания на ларви, третирани с биосърфактанти, показват увреждане на храносмилателния тракт, средното черво, мозъчната кора и хиперплазия на чревните епителни клетки. Резултати: Токсикологичната оценка на антитермитната и ларвицидната активност на рамнолипиден биосърфактант, произведен от Enterobacter cloacae SJ2, разкри, че този изолат е потенциален биопестицид за контрол на векторно пренасяни болести от комари (Cx quinquefasciatus) и термити (O. obesus). Необходимо е да се разбере основната екологична токсичност на биосърфактантите и тяхното потенциално въздействие върху околната среда. Това проучване предоставя научна основа за оценка на екологичния риск от биосърфактанти.
Време на публикуване: 09 април 2024 г.